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              溴化乙錠(EB)的凈化處理方法-試驗方案
              更新時間:2010-05-26   點擊次數(shù):3589次

              溴化乙錠是強誘變劑,并有中度毒性。取用含有這一染料的溶液時務必戴上手套,溶液使用后應按下面介紹的方法之一進行凈化處理。

              1. 溴化乙錠濃溶液(即濃度>0.5mg/ml 的溴化乙錠溶液)的凈化處理

              方法一:用沙門氏菌-微粒體測定法表明,本方法可使EB的誘變活性降至原來的1/200 左右。

              (1) 加入足量的水使EB的濃度降低至0.5mg/ml以下。

              (2) 在所得的溶液中加入0.2體積的新配制的5%次磷酸和0.12體積的新鮮配置的0.5mol/L亞硝酸鈉,小心混勻。切記:檢測該溶液的pH值應<3.0,市售次磷酸一般為50%溶液,具有腐蝕性,應小心操作,必須在臨用前現(xiàn)用現(xiàn)稀釋。亞硝酸鈉溶液(0.5mol/L)的配法:用水溶解34.5g亞硝酸鈉并定容至終體積500ml,現(xiàn)用現(xiàn)配。

              (3) 于室溫溫育24小時后,加入大大過量的1mol/L碳酸氫鈉,該溶液可予丟棄。

              方法二:用沙門氏菌-微粒體測定法檢查,經用本方法處理后,可使EB的誘變活性降低至原來的1/3000左右。但也有報告稱,在用凈化溶液處理的空白樣品中,偶爾有一些仍具有誘變活性。

              (1) 加入足量的水使EB的濃度降低至0.5mg/ml 以下。

              (2) 加入1倍體積的0.5mol/L KMnO4,小心混合后再加入1倍體積的2.5mol/L HCl,小心混勻,于室溫放置數(shù)小時。

              (3) 加入1倍體積的2.5mol/L NaOH,小心混合后可丟棄該溶液。

              2. EB稀溶液(如含有0.5μg/ml EB的電泳緩沖液)的凈化處理

              方法一

              (1) 每100ml溶液中加入2.9g Amberlite XAD-16,這是一種非離子型多聚吸附劑,可向Rohm & Haas公司購置。

              (2) 于室溫放置12小時,不時搖動。

              (3) 用Whatman 1號濾紙過濾溶液,丟棄濾液。

              (4) 用塑料袋封裝濾紙和Amberlite樹脂,作為有害廢物予以丟棄。

              方法二

              (1) 每100ml溶液中加100mg粉狀活性炭。

              (2) 于室溫放置1小時,不時搖動。

              (3) 用Whatman 1號濾紙過濾溶液,丟棄濾液。

              (4) 用塑料袋封裝濾紙和活性炭。

              注:用次氯酸(漂白劑)處理EB稀釋液并不可取;EB在262℃分解,在標準條件進行焚化后不可能再有危害性;Amberlite XAD-16 或活性炭可用于凈化被EB污染的物體表面。
               

              上海通蔚生物科技有限公司

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