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              2013選購ELISA試劑盒不能說的秘密
              更新時間:2013-09-29   點(diǎn)擊次數(shù):1024次

                多年來因為ELISA試劑盒有著準(zhǔn)確性高、靈敏度高、特異性強(qiáng)的諸多優(yōu)點(diǎn),獲得了廣大師生朋友的喜愛。現(xiàn)在市面上國產(chǎn)與進(jìn)口的ELISA試劑盒,數(shù)量之多,數(shù)不勝數(shù),令人目不暇接,質(zhì)量問題也在為廣大科研工作愛好者與研究者,糾結(jié)的問題,下面小編將告訴您幾個選購ELISA試劑盒,幾個不能說的秘密.
              1. 檢測方法
              酶可以結(jié)合在一抗上,也可以結(jié)合在二抗上,還可以使用鏈霉親和素標(biāo)記的酶與親和素標(biāo)記的一抗結(jié)合。
              此外ELISA的結(jié)果檢測還包括放射性檢測、熒光檢測、化學(xué)發(fā)光或顯色法檢測等。
              如今檢測ELISA有許多途徑,我們可以根據(jù)自己的偏好進(jìn)行選擇。
              一般ELISA檢測的是酶促反應(yīng)的可溶性產(chǎn)物,抗體上結(jié)合有相應(yīng)的酶(例如通常使用的辣根過氧化物酶HRP),而反應(yīng)體系中添加有相應(yīng)的底物(如3,3-二氨基聯(lián)苯胺DAB)。
              這種酶促反應(yīng)生成具有特征性的顏色,可以通過分光光度計進(jìn)行檢測,堿性磷酸酶AP也是一種常用酶。

                2. 分析抗體類型
              單克隆抗體和多克隆抗體都能夠用于ELISA試劑盒,實際上有時候二者結(jié)合效果更好。例如,對于雙抗夾心法而言,用多抗進(jìn)行捕獲而單抗進(jìn)行檢測有時更有幫助。
              多抗能夠確保捕獲所有抗原,隨后單抗再特異性檢測擁有特定抗原表位的抗原。
              3. 交叉產(chǎn)生的反應(yīng)
              如果抗體間發(fā)生沖突或交叉反應(yīng)就會影響整個實驗的特異性。其中抗體來源所帶來的兼容性就是交叉反應(yīng)的一個因素。
              盡管現(xiàn)在購買源自動物的抗體越來越容易,我們?nèi)杂斜匾_認(rèn)一下是否會產(chǎn)生交叉反應(yīng)的問題。在用雙抗夾心法進(jìn)行ELISA檢測時,檢測用的二抗必須特異性針對檢測一抗,而不能與捕獲抗體起反應(yīng)。
              如果檢測用二抗與捕獲抗體結(jié)合,實驗特異性就會大打折扣。通常我們選用源自不同宿主的捕獲抗體和檢測一抗,來避免上述問題。

              4、試劑盒的實驗類型
              ELISPOT有點(diǎn)像蛋白印跡Western blot,先在帶膜的微孔板中培養(yǎng)細(xì)胞,然后在膜上檢測細(xì)胞分泌的抗原形成斑點(diǎn)。此外,我們還需要根據(jù)自身需要選擇96孔板或是384孔板進(jìn)行ELISA實驗。
                      雖然有多種類型,不過它們都有一個共同特點(diǎn),就是進(jìn)行抗原捕獲。
                      一般捕獲形式包括將抗原吸附到微孔板或者用微孔板上的抗體進(jìn)行捕獲。In-cell ELISA和酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)ELISPOT是兩種特殊的類型,In-cell ELISA需要將微孔板中培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行固定和通透化,然后再用抗體原位檢測。
              如果您對考慮購買的ELISA試劑盒還有任何疑問,都可以直接向我們咨詢。為您服務(wù)是我們的榮幸。

              上海通蔚生物科技有限公司

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              主營產(chǎn)品:ELISA檢測試劑盒,ELISA試劑盒,酶聯(lián)免疫試劑盒,人ELISA試劑盒,大鼠ELISA試劑盒,小鼠ELISA試劑盒,豚鼠ELISA試劑盒,兔ELISA試劑盒,羊ELISA試劑盒,牛ELISA試劑盒,雞ELISA試劑盒,鴨ELISA試劑盒

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