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              2014公司ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)知識(shí)培訓(xùn)
              更新時(shí)間:2014-02-07   點(diǎn)擊次數(shù):972次

              在做ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)過程中,難免會(huì)遇到各種不同的問題,比如標(biāo)準(zhǔn)曲線不好,試劑盒的回收率,假陰性,假陽(yáng)性,實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性不好等等。現(xiàn)在就來一一解答用戶們?cè)趯?shí)驗(yàn)過程中遇到的各種疑問!
              ELISA試劑盒曲線問題: 

              1.OD值不正常

              試劑盒未回溫,試劑盒回溫到25℃

              溫度控制不好,控制正確溫度

              孵育時(shí)間不準(zhǔn)確,控制孵育時(shí)間

              洗滌時(shí)沖擊力太大、浸泡時(shí)間過長(zhǎng)、洗滌次數(shù)增 加,洗滌4-5次,每孔250ul,然后拍干

              陽(yáng)光直射,對(duì)著風(fēng)直接吹,避風(fēng)避

              酶標(biāo)儀的波長(zhǎng)錯(cuò)誤,酶標(biāo)儀的波長(zhǎng)450nm

              抗體的稀釋錯(cuò)誤,正確的稀釋抗體

              水質(zhì)問題,用娃哈哈礦泉水代替

              2.白   板

              洗滌液配制錯(cuò)誤,正確的配制洗滌液

              少加液體(錯(cuò)加液體),正確的步驟加液體

              3.無 梯 度

              標(biāo)準(zhǔn)品也污染,換標(biāo)準(zhǔn)品點(diǎn)板

              OD值不正常,控制溫度時(shí)間在做一次

              人為點(diǎn)板,不要點(diǎn)板

              4.線 性 不 好

              OD值不正常,控制溫度時(shí)間在做一次

              ELISA試劑盒回收率

              1.空白管陽(yáng)性高

              樣本本身就是陽(yáng)性樣本,換陰性樣本做回收率

              空白管在實(shí)驗(yàn)中被污染,實(shí)驗(yàn)中防止交叉污染

              水質(zhì)原因用,娃哈哈礦泉水代替

              2.偏  高

              添加量不準(zhǔn)確,的添加量

              添加濃度不適合,添加合適的濃度

              取液吹干量多,準(zhǔn)確的取液吹干

              取到其它相層液體,取需用相吹干

              復(fù)溶液未稀釋或加入量少,正確的稀釋復(fù)溶液

              ELISA試劑盒3.偏  低

              添加量不準(zhǔn)確,的添加量

              添加濃度不適合,添加合適的濃度

              取液吹干量少,準(zhǔn)確的取液吹干

              復(fù)溶液稀釋錯(cuò)誤或加入量多,正確的稀釋復(fù)溶液

              假陰、陽(yáng)性

              1,水質(zhì)原因:點(diǎn)復(fù)溶液驗(yàn)證,用娃哈哈礦泉水代替

              2,實(shí)驗(yàn)操作原因

              吸取到其它相吹干,準(zhǔn)確的取液吹干

              離心不*,延長(zhǎng)離心時(shí)間

              樣本的污染,更換樣本

              乳化未處理*,溫浴(70℃)處理乳化現(xiàn)象

              3,儀器試劑原因

              離心管未清洗干凈,正確的洗滌器具

              有機(jī)溶劑的影響,ELISA試劑盒做試劑空白看影響結(jié)果

              4,衍生化試劑原因(長(zhǎng)時(shí)間衍生化試劑變質(zhì)),更換衍生化試劑

              5,與曲線好壞相關(guān),,保證曲線的正常

               

              上海通蔚生物科技有限公司

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              地址:上海市金山區(qū)楓涇鎮(zhèn)環(huán)東一路65弄2號(hào)3463室

              主營(yíng)產(chǎn)品:ELISA檢測(cè)試劑盒,ELISA試劑盒,酶聯(lián)免疫試劑盒,人ELISA試劑盒,大鼠ELISA試劑盒,小鼠ELISA試劑盒,豚鼠ELISA試劑盒,兔ELISA試劑盒,羊ELISA試劑盒,牛ELISA試劑盒,雞ELISA試劑盒,鴨ELISA試劑盒

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