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              關于ELISA試劑盒實驗基礎知識培訓
              更新時間:2014-04-29   點擊次數(shù):913次

              在做ELISA試劑盒實驗過程中,難免會遇到各種不同的問題,比如標準曲線不好,試劑盒的回收率,假陰性,假陽性,實驗的重復性不好等等。現(xiàn)在就來一一解答用戶們在實驗過程中遇到的各種疑問!
              ELISA試劑盒曲線問題: 

              1.OD值不正常

              試劑盒未回溫,試劑盒回溫到25℃

              溫度控制不好,控制正確溫度

              孵育時間不準確,控制孵育時間

              洗滌時沖擊力太大、浸泡時間過長、洗滌次數(shù)增 加,洗滌4-5次,每孔250ul,然后拍干

              陽光直射,對著風直接吹,避風避

              酶標儀的波長錯誤,酶標儀的波長450nm

              抗體的稀釋錯誤,正確的稀釋抗體

              水質問題,用娃哈哈礦泉水代替

              2.白   板

              洗滌液配制錯誤,正確的配制洗滌液

              少加液體(錯加液體),正確的步驟加液體

              3.無 梯 度

              標準品也污染,換標準品點板

              OD值不正常,控制溫度時間在做一次

              人為點板,不要點板

              4.線 性 不 好

              OD值不正常,控制溫度時間在做一次

              ELISA試劑盒回收率

              ELISA試劑盒1.空白管陽性高

              樣本本身就是陽性樣本,換陰性樣本做回收率

              空白管在實驗中被污染,實驗中防止交叉污染

              水質原因用,娃哈哈礦泉水代替

              2.偏  高

              添加量不準確,的添加量

              添加濃度不適合,添加合適的濃度

              取液吹干量多,準確的取液吹干

              取到其它相層液體,取需用相吹干

              復溶液未稀釋或加入量少,正確的稀釋復溶液

              ELISA試劑盒3.偏  低

              添加量不準確,的添加量

              添加濃度不適合,添加合適的濃度

              取液吹干量少,準確的取液吹干

              復溶液稀釋錯誤或加入量多,正確的稀釋復溶液

              假陰、陽性

              1,水質原因:點復溶液驗證,用娃哈哈礦泉水代替

              2,實驗操作原因

              吸取到其它相吹干,準確的取液吹干

              離心不*,延長離心時間

              樣本的污染,更換樣本

              乳化未處理*,溫浴(70℃)處理乳化現(xiàn)象

              3,儀器試劑原因

              離心管未清洗干凈,正確的洗滌器具

              有機溶劑的影響,ELISA試劑盒做試劑空白看影響結果

              4,衍生化試劑原因(長時間衍生化試劑變質),更換衍生化試劑

              5,與曲線好壞相關,,保證曲線的正常

              上海通蔚生物科技有限公司

              上海通蔚生物科技有限公司

              地址:上海市金山區(qū)楓涇鎮(zhèn)環(huán)東一路65弄2號3463室

              主營產品:ELISA檢測試劑盒,ELISA試劑盒,酶聯(lián)免疫試劑盒,人ELISA試劑盒,大鼠ELISA試劑盒,小鼠ELISA試劑盒,豚鼠ELISA試劑盒,兔ELISA試劑盒,羊ELISA試劑盒,牛ELISA試劑盒,雞ELISA試劑盒,鴨ELISA試劑盒

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